Detail předmětu
Pokročilé fluorescenční techniky
FCH-DC_PFTAk. rok: 2021/2022
Cílem předmětu je představit studentům různé fluorescenční techniky a jejich aplikaci s intepretací získaných výsledků. Student bude jev fluorescence představen od základu interakce světla a hmoty až po superrozlišené mikroskopické techniky. V rámci předmětu budou probírány tyto techniky: časově rozlišená emisní spektroskopie, anizotropie, rezonanční přenos energie, zhášení fluorescence, fluorescenční korelační spektroskopie, dvoubarevná fluorescenční křížově-korelační spektroskopie. U každé metody budou uvedeny praktické příklady, jejich výhody, omezení i způsoby interpretace.
Garant předmětu
Zajišťuje ústav
Výsledky učení předmětu
Absolvent tohoto předmětu bude rozumět základním pojmům z fluorescenční spektroskopie. Bude se orientovat v technikách stacionárních, časově rozlišených i mikroskopických. Budou mu poskytnuty praktické informace o způsobu měření a a analýze příslušných dat.
Prerekvizity
fyzika, fyzikální chemie
Doporučená nebo povinná literatura
Lakowicz, J.R. Principles of Fluorescence 3rd ed., Springer, Baltimore, 2006 (EN)
Valeur, B.; Berberan-Santos, M.N. Molecular Fluorescence: Principles and Applications, Wiley‐VCH Verlag GmbH & Co. KGaA, 2012 (EN)
Způsob a kritéria hodnocení
Zkouška: psaná a ústní.
Jazyk výuky
čeština
Osnovy výuky
- Co je světlo a hmota? Historický přehled. Nástroje popisu.
- Rozptyl a Absorpce záření – elektronové, vibrační a rotační přechody. Osud excitovaného stavu. Kinetika. Nelineární optické jevy.
- Solvatochromismus a ostatní efekty prostředí.
- Absorpční spektrofotometrie – uv-vis-ir, spektrofotometry a pokročilé techniky.
- Fluorescenční spektroskopie stacionární – fluorimetry, druhy spekter, kvantový výtěžek
- Fluorescenční spektroskopie časově rozlišená – časová vs. frekvenční doména, instrumentace a principy
- Mikroskopie – viditelná, fluorescenční, konfokální – principy a instrumentace
- Fluorescenční korelační spektroskopie – autokorelační funkce, kros-korelační funkce, instrumentace, principy měření, modely
-„Supermikroskopie“ – STED, dSTORM, PALM, PAINT atd. – principy a využití
- Nejčastější chyby a omyly v měření.
Cíl
Cílem předmětu je představit studentům základní i pokročilé informace o technikách využívající jevu fluorescence.
Vymezení kontrolované výuky a způsob jejího provádění a formy nahrazování zameškané výuky
Účast na přednáškách je nepovinná, doporučená.